В вакцине Спутник-V используется аденовирус 26-го типа (Ad26) в первой дозе, и 5-го типа (Ad5) во второй дозе. В обоих дозах используется генетически изменённые аденовирусы. И у Ad26, и у Ad5, удалён ген E1, необходимый для размножения, и добавлен ген, который кодирует белок шипа (spike) от коронавируса.
Как первая, так и вторая доза приводит к формированию у человека антител к белку шипа. Каждая доза вакцины содержит (1,0 ± 0,5) × 10^11 частиц гена белка шипа.
Для размножения аденовируса при производстве вакцины используется клеточная культура HEK 293 (human embryonic kidney), которая производит, в том числе, ген E1. Иными словами, аденовирус из вакцины может размножаться только в клеточной культуре HEK 293, но не в организме человека. Рекомбинация между последовательностью из клеточной культуры HEK 293 и последовательностью вектора может восстановить репликационную способность вектора, что проводит к появленю менее чем 100 реплицирующихся аденовирусных частиц на дозу вакцины.
Ревакцинацию можно проводить любой вакциной, но не ранее, чем через 6 месяцев.